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辣根过氧化物酶的实验原理

2011年12月12日 11:05:22人气:1038来源:上海沪峰生物科技有限公司

中文名称:辣根过氧化物酶

英文名称:horseradish peroxidase;HRP

实验原理
过氧化物酶催化以下反应:  

2 H2O2 ─→ O2+2H2O   

这一类酶以铁卟啉为辅基,所以属血红素蛋白质类(hemeProteins)。过氧化物酶在生物界分布极广,在细胞代谢的氧化还原过程中起重要的作用。   

本实验是以辣根为原料,经过水的抽提,硫酸铵和丙酮分级分离,再经锌离子纯化,透析除盐,冷冻干燥,zui后制得高纯度的辣根过氧化物酶。  

辣根过氧化物酶分子量在40,000左右,是一种含亚铁血红素的蛋白质,等电点7.2;易溶于水,溶解度为5%(W/V),溶液呈棕红色,透明;也溶于0.58饱和度以下的硫酸铵溶液,而0.62饱和度以上则不溶。该酶zui适pH为7.0(对愈创木酚为氢给体而言)。在室温下HRP在几周内保持稳定,加热到63℃后15分钟内稳定。

 

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