惠州市东方保健科技有限公司作者
保健食品中总皂苷的测定
1试剂
1.1 D-101大孔吸附树脂,
1.2乙醇 分析。
1.3药用脱脂棉花。
1.4人参皂苷Re 购自中国药品生物制品检定所。
1.5*溶液 称取5g*,加冰乙酸溶解并定容至100mL。
1.6高氯酸 分析
1.7冰乙酸 分析
1.8人参皂苷Re标准溶液:称取人参皂苷Re标准品0.020g,用甲醇溶解并定容至10.0mL,即每毫升含人参皂苷Re 2.0mg。
2仪器
2.1比色计
2.2层析柱
3实验步骤
3.1试样处理:称取1.000g左右的试样 (根据试样含人参量定),放50mL容量瓶中,加少量甲醇,超声30min,再用甲醇定容至50mL,摇匀,放置过夜,吸取上清液5.0mL,于蒸发皿中,放水浴挥干。残渣用蒸馏水溶解后进行柱层析。
3.2柱层析:用10mL注射器作层析管,内装D-101大孔吸附树脂,上加少量药用脱脂棉花压住树脂。先用25mL70%乙醇洗柱,弃去洗脱液,再用25mL水洗柱,弃去洗脱液,加入5.0mL已处理好的试样溶液(见3.1),用水洗柱至无色,以洗去糖份等水溶性杂质,弃去洗脱液,用约50ml的70%乙醇洗脱皂甙,收集洗脱液于蒸发皿中,放水浴挥干,残渣用甲醇定容至5.0ml,作为供试品溶液。
3.3显色:吸取标准溶液0、20、40、60、80、100μl置于10ml具塞管中,在
水浴中蒸干,准确加入0.2mL5%*冰乙酸溶液,再加0.8mL高氯酸,混匀后加盖,放在60°C的水浴中加温10min,取出,水浴冷却后,准确加入乙酸5.0mL摇匀,以1cm比色杯于560nm波长处比色测定。绘制标准曲线或计算线性回归方程。
3.4样品测定:精密吸取适量供试品溶液,置于10ml具塞管中,在水浴中蒸干,(勿使过热),以下操作从“2.3.3显色…”起,与标准液相同。测定吸光度值。
4计算:
式中:
X:试样中人参总皂苷量(以人参皂苷Re计),mg/100g;
C:从线性回归方程计算得出的人参总皂苷量含量(μg),
V:样品液定容体积,ml
V1 样品液取样体积,ml
m:试样质量,g。
计算结果保留二位有效数字。
注:本方法依据为卫生部《保健食品检验与评价技术规范》2003年版306页的检测方法修正。原方法是为终端产品的检测方法,需要再提取后检测,而原料产品没受到其它成份的干扰,所不需要此步骤,可直接溶解检测。
惠州市东方植物保健科技有限公司
2015年9月21日
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