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如何更好地运用ELISA试剂盒?

2016年10月10日 11:01:32人气:104来源:上海邦景实业有限公司

人ELISA试剂盒实验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,但是真正到自己上手的时候还是会犯糊涂,出状况!如何更好地运用ELISA试剂盒、掌握ELISA实验呢?
1.对于一些小分子的检测,一般来说,要用竞争法ELISA去检测,也要购买采用这个方法的盒子。一般细胞因子的检测,都是采用常规的夹心法ELISA检测,因为因子分子量比较大,一般10几个KD左右,很容易找到两个或者多个抗原表位。
而小分子很难找到两个不同的表位,也就决定了包被抗体和检测抗体无法同时结合小分子并固相化。解决方案就是酶标板上包被二抗,每个孔加入一定量的酶标的小分子,然后加样品,再加不带标记的检测抗体,显色底物。样品的目的小分子的含量越高,吸光度越低。
2.还有一个问题,这是不是客户的误区,就是拿来一个指标就想当然地尝试用ELISA去检测。ELISA检测方法简单,灵敏度高,但是该检测活性的检测活性,该做western的做western。 
人ELISA试剂盒的操作提醒:
1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
3.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
4.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
5.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。 
要想熟练的灵活运用ELISA试剂盒,还需要多动手操作。
PSAP    前列腺酸性磷酸酶抗体
PRAS40    蛋白激酶AKT底物1抗体
PAK1    p21激活激酶1抗体
HGV Polyprotein    庚型肝炎病毒多聚蛋白抗体
PBEF1    内脂素/内脏脂肪素/前B细胞克隆增强因子1抗体
Proinsulin    胰岛素原抗体
Podoplanin Protein    平足蛋白gp36/淋巴管内皮细胞蛋白抗体
ENPP1    核苷酸内焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗体
PTF1A    胰腺特异转录因子PTF1A抗体
PTPRS    蛋白*磷酸酶PTPσ抗体
Pet1    ETS结构域转录因子FEV抗体
Plexin A3    神经丛蛋白A3抗体
phospho-PTPN6    磷酸化蛋白*磷酸酶1C抗体
PPP4C    */*蛋白磷酸酶4C抗体
人ELISA试剂盒

 

 

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