植物组织中游离氨基酸总量SLISA可以测定

人ELISA试剂盒游离氨基酸的氨基可与水合茚三酮反应，产生蓝紫色化合物，其颜色的深浅与游离氨基酸的含量成正比。
分光光度计；电子天平；容量瓶25ml或50ml 3个；漏斗（直径6厘米）3个、滤纸适量；20ml刻度试管 7支；移液管0.5ml 3支、5ml 1支；试管架；玻棒；吸耳球；剪刀；移液管架；橡皮筋、塑料薄膜（封试管口）；吸水纸；擦镜纸适量；电炉；水浴锅（含铁丝筐）。
1．3%茚三酮试剂 称3g茚三酮用95%乙醇溶解定容到100ml容量瓶里，贮于棕色瓶中。此试剂应放在冷凉处，不宜久放，使用期约10天。
2．氰酸盐缓冲液（按以下方法配制）：
（1）NaCN贮备液0.01mol/L（490mg/L）。
（2）醋酸缓冲液：称360g*（含三分子结晶水）溶于约300ml无氨蒸馏水中，加66.67ml冰醋酸再用无氨蒸馏水稀释至1L。
取溶液（1）20ml，用溶液（2）定容到1L。
3．标准氨基酸 称取在80℃下烘干的*13.1mg（或α-*8.9mg）溶于10%的异丙醇中，并在100ml容量瓶中用10%异丙醇稀释至刻度，混匀，即为1mmol/L的标准氨基酸贮备液，置冰箱中保存。为了制备工作液，可取贮备液与等量无氨蒸馏水混合，此液浓度为0.5mmol/L，即1ml含氨基酸0.5μmol，或氨基氮7μg。
4．95%乙醇；5．异丙醇（分析纯）。
人ELISA试剂盒1．标准曲线的制作 取20ml刻度试管18支，按下表15-1加入各试剂。加完试剂后混匀，在100℃水浴中加热12min（加热时封口），取出在冷水中迅速冷却，立即于每管中加入5ml 95%乙醇，塞好塞子，猛摇试管，使加热时形成的红色产物被空气中的氧所氧化而褪色，此时溶液呈蓝紫色。于570nm波长下测其光密度（以空白管为参比），以氨基酸浓度为横坐标，光密度为纵坐标，绘制标准曲线，求出直线方程。
2．样品提取 选取有代表性的植物叶片（或其它组织），洗净擦干，剪碎混匀，迅速称取0.10～0.20g（视氨基酸含量多少而定），共称3份，分别加入20ml刻度试管中，再加蒸馏水10ml盖塞（或系上塑料薄膜），置沸水浴中20min以提取游离氨基酸，到时取出在自来水中冷却，把上清液滤入25ml容量瓶中，之后再往试管中加5ml蒸馏水，置沸水浴上再加热10min，过滤并反复冲洗残渣，zui后定容至刻度，摇匀。
3．样品测定 另取4支洁净干燥的试管，其中3支分别加入0.5ml提取液，另一支加0.5ml蒸馏水，然后在上述4支试管中分别加入NaCN缓冲液、水合茚三酮各0.5ml，加完试剂后盖塞，置沸水浴上加热12min，冷却后，再分别加5ml 95%乙醇，摇匀，以空白作参比，在波长570nm下测其光密度。
E.coli O157:H7    肠出血性大肠杆菌埃希氏菌O157:H7抗体                
phospho-ERK1 (Thr202+Tyr204) + ERK2 (Thr185+Tyr187)    磷酸化丝裂原活化蛋白激酶ERK抗体                
EMR2    CD312抗体                
eIF4EBP1    eIF4E结合蛋白抗体                
Phospho-EGFR (Ser1045)    磷酸化表皮生长因子受体抗体                
Phospho-EGFR (Tyr1138)    磷酸化表皮生长因子受体抗体                
Ephrin A1 Receptor    肝配蛋白A1受体抗体                
eIF2C2    真核翻译起始因子2C2抗体                
EYA2    眼睛发育缺失蛋白EYA2抗体                
EYA4    EYA4蛋白抗体                
ELK4    血清反应因子辅助蛋白1抗体                
ELMO2    吞噬细胞运动蛋白2抗体                
EPB41    红细胞膜条带4.1蛋白抗体
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