elisa试剂盒血清学三大类别的应用

上海elisa试剂盒血清学反应是指：相应的抗原与抗体在体外一定条件下作用，可出现肉眼可见的沉淀、凝集现象。在食品微生物检验中，常用血清学反应来鉴定分离到的细菌，以zui终确认检测结果。

1)抗原体的结合具有特异性，当有共同抗原体存在时，会出现交叉反应。

2)抗原体的结合是分子表面的结合，这种结合虽相当稳定，但是可逆的。

3)抗原体的结合是按一定比例进行的，只有比例适当时，才能出现可见反应。

4)血清学反应大体分为两个阶段进行，但其间无严格界限。*阶段为抗原体特异性结合阶段，反应速度很快，只需几秒至几分钟反应即可完毕，但不出现肉眼可见现象。第二阶段为抗原体反应的可见阶段，表现为凝集、沉淀、补体结合反应等。反应速度慢，需几分、几十分以至更长时间。而且，在第二阶段反应中，电解质、PH、温度等环境因素的变化，都直接影响血清学反应的结果。

习惯上将经典的血清学反应分三种类别：凝集反应、沉淀反应和补体结合反应。

凝集反应：颗粒性抗原（细菌、红细胞等）与相应抗体结合，在电解质参与下所形成的肉眼可见的凝集现象，称为凝集反应（Agglutinationreaction）。其中的抗原称为凝集原，抗体称为凝集素。在该反应中，因为单位体积抗体量大，做定量实验时，应稀释抗体。

1.直接凝集反应：颗粒性抗原与相应抗体直接结合所出现的反应，称为直接凝集反应。a.玻片凝集法。是一种常规的定性试验方法。原理是用已知抗体来检测未知抗原。常用于鉴定菌种、血型。如将含有痢疾杆菌抗体的血清与待检菌液各一滴，在玻片上混匀，数分种后若出现肉眼可见的凝集块，即阳性反应，证明该菌是痢疾杆菌。此法快速、简便，但不能进行定量测定。b.试管凝集法。是一种定量试验方法。多用已知抗原来检测血清中有无相应抗体及其含量。常用于协助诊断某些传染病及进行流行病学调查。如肥达氏反应就是诊断伤寒、付伤寒的试管凝集试验。因为要测定抗体的含量，故将待检查的血清用等渗盐水倍比稀释成不同浓度，然后加入等量抗原，37℃或56℃，2~4小时观察，血清zui高稀释度仍有明显凝集现象的，为该抗血清的凝集效价。
2.间接凝集反应：将可溶性抗原（抗体）先吸附在一种与免疫无关的，颗粒状微球表面，然后与相应抗体（抗原）作用，在有电解质存在的条件下，即可发生凝集，称为间接凝集反应。由于载体增大了可溶性抗原的反应面积。当载体上有少量抗原与抗体结合。就出现肉眼可见的反应，敏感性很高。

沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体结合，在有适量电解质存在下，经过一定时间，形成肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应。反应中的抗原称为沉淀原，抗体为沉淀素。由于在单位体积内抗原量大，为了不使抗原过剩，故应稀释抗原，并以抗原的稀释度作为沉淀反应的效价。１）环状沉淀反应：是一种定性试验方法，可用已知抗体检测未知抗原。将已知抗体注入特制小试管中，然后沿管壁徐徐加入等量抗原，如抗原与抗体对应，则在两液界面出现白色的沉淀圆环。２）絮状沉淀反应：将已知抗原与抗体在试管（如凹玻片）内混匀，如抗原抗体对应，而又二者比例适当时，会出现肉眼可见的絮状沉淀，此为阳性反应。３）琼脂扩散试验：利用可溶性抗原抗体在半固体琼脂内扩散，若抗原抗体对应，且二者比例合适，在其扩散的某一部分就会出现白色的沉淀线。每对抗原抗体可形成一条沉淀线。有几对抗原抗体，就可分别形成几条沉淀线。琼脂扩散可分为单向扩散和双向扩散两种类型。单向扩散是一种定量试验。可用于免疫蛋白含量的测定。而双向扩散多用于定性试验。由于方法简便易行，常用于测定分析和鉴定复杂的抗原成分。

补体结合反应：是在补体参与下，以绵羊红细胞和溶血素作为指示系统的抗原抗体反应。补体无特异性，能与任何一组抗原抗体复合物结合而引起反应。如果补体与绵羊红细胞、溶血素的复合物结合，就会出现溶血现象，如果与细菌及相应抗体复合物结合，就会出现溶菌现象。因此，整个试验需要有补体、待检系统（已知抗体或抗原、未知抗原或抗体）及指示系统（绵羊细胞和溶血素）五种成份参加。其试验原理是补体不单独和抗原或抗体结合。如果出现溶菌，是补体与待检系统结合的结果，说明抗原抗体是相对应的，如果出现溶血，说明抗原抗体不相对应。上海elisa试剂盒此反应操作复杂，敏感性高，特异性强，能测出少量抗原和抗体，所以应用范围较广。

反式-(1R,2R)-2-氨基环戊醇盐酸盐    4-氨基-2-氯嘧啶    *
2-氨基-5-溴-3-苄氧基吡啶    去甲氨噻肟酸乙酯    磷酸二氢钙 一水合物
2-甲基-6-三氟甲基*    4-糠硫基-4-甲基-2-戊酮    2-（二苯基羟亚膦基）乙基三乙氧基硅烷
4-氯-7-氮杂吲哚    3-羟基丙烷-1-磺酸钠    4-氯苯甲酰甲酸乙酯
麦芽糖醇    2,4-二(二氟甲基)氰苯    苄氧基乙酸乙酯
4-溴-2-羟基苯甲腈    4-甲基辛酸    3-氟-4-甲氧羰基苯基硼酸
  2,4-二氯苯乙醇    2,3-二氢-1,4-苯并二烷-5-羧酸
N-甲基-4-氯哌啶    萘1,3,6-三磺酸三钠盐水合物    2-氨基-3,5-二溴吡嗪
3-羰基-环丁烷甲酸甲酯    2-氰基-4-甲氧基苯甲醛    3-溴甲基噻吩
3,5-二氨基三氟甲苯    2-氨基-3-溴-5-氯吡啶    1，3，3-三乙氧基丙烷
异丙基三苯基碘化膦    4,4'-氧双邻苯二甲酸酐    *
5-溴-2-氟嘧啶    乳酸甲酯    1,3-二溴-5-(三氟甲氧基)苯
苄磺酰氯    2-氯-4-氟苯基乙酸    2'-羟基苯丙酮
2,5-二氯-3-硝基吡啶    高氯酸四乙基铵    2-氨基-4-氯三氟甲苯
α-萜品烯    3-乙酰氧基苯甲醛    4-氯丁醇醋酸酯
4-甲基-2-戊基-1,3-二氧戊环    3-氯-5-氟*    2-甲氧基-3-硝基吡啶
柠檬酸铁水合物    3-[[5-甲基-2-(1-甲基乙基)环己基]氧]-1,2-丙二醇    2-溴噻唑-5-羧酸

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