elisa试剂盒等电聚焦电泳pH梯度组成原理

进口elisa试剂盒等电聚焦电泳(IEF，isoelectric focusing electrophoresis)在IEF的电泳中，具有pH梯度的介质其分布是从阳极到阴极，pH值逐渐增大。蛋白质分子具有两性解离及等电点的特征，这样在碱性区域蛋白质分子带负电荷向阳极移动，直至某一pH位点时失去电荷而停止移动，此处介质的pH恰好等于聚焦蛋白质分子的等电点(pl)。同理，位于酸性区域的蛋白质分子带正电荷向阴极移动，直到它们的等电点上聚焦为止。可见在该方法中，等电点是蛋白质组分的特性量度，将等电点不同的蛋白质混合物加入有pH梯度的凝胶介质中，在电场内经过一定时间后，各组分将分别聚焦在各自等电点相应的pH位置上，形成分离的蛋白质区带。
天然pH梯度的建立是在水平板或电泳管正负极间引入等电点彼此接近的一系列两性电解质的混合物，在正引入酸液，如硫酸、磷酸或醋酸等，在负引入碱液，如*、氨水等。电泳开始前两性电解质的混合物pH为一均值，即各段介质中的pH相等，用pH0表示。电泳开始后，混合物中pHzui低的分子，带负电荷zui多，pI1为其等电点，向正极移动速度zui快，当移动到正极附近的酸液界面时，pH突然下降，甚至接近或稍低于PI1，这一分子不再向前移动而停留在此区域内。由于两性电解质具有一定的缓冲能力，使其周围一定的区域内介质的pH保持在它的等电点范围。pH稍高的第二种两性电解质，其等电点为pI2，也移向正极，由于pI2>pI1，因此定位于*种两性电解质之后，这样，经过一定时间后，具有不同等电点的两性电解质按各自的等电点依次排列，形成了从正极到负极等电点递增，由低到高的线性pH梯度。
进口elisa试剂盒pH梯度的组成方式有二种，一种是人工pH梯度，由于其不稳定，重复性差，现已不再使用。另一种是天然pH梯度。
130990-50 酵母 DNAout 50 次
130991-50 柱式酵母 DNAout 50 次
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130992-50 玻璃珠法柱式酵母 DNAout 50 次
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130994-1 96 孔板质粒 DNAout( 真空法 ) 1次
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130995-25 Cy3-dCTP 溶液，10mM 25μL
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130996-25 Cy5-dCTP 溶液，10mM 25μL
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130997-10 Sephadex G50 介质 10mL
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131002-10 AP 标记的抗*抗体 10μL
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进口elisa试剂盒