上海抚生实业有限公司作者
进口elisa分析检测试剂盒实验操作的小秘诀:
1. 标本的采取和保存
大部分ELISA 检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP 为标记的ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。一般说来,在5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的试剂本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。
抗凝不*的标本因纤维蛋白原的干扰而造成假阳性,建议尽量不用抗凝血尤其是肝素抗凝剂。
2.加样
加样时应将所加物加在ELISA 板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出。
3.保温
在建立ELISA 方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经
1-2 小时,产物的生成可达。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,反应板不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。由于公司的试剂盒温育是在空气浴中完成,采用水浴会造成值偏高或花板。另外温育中还有边缘效应,边上的值会偏高,建议为了客观的判断结果,将质控放在非边缘位置。
4.洗涤
洗涤在ELISA 过程中虽不是一个反应步骤,但却决定着实验的成败。ELSIA 就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA 操作中,洗涤是zui主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。
进口elisa分析检测试剂盒大鼠*型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒 ,英文名: uPA ELISA Kit
大鼠*(UK)ELISA试剂盒 ,英文名: UK ELISA Kit
大鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶2(UGT2)ELISA试剂盒 ,英文名: UGT2 ELISA Kit
大鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1(UGT1)ELISA试剂盒 ,英文名: UGT1 ELISA Kit
大鼠*氨基甲酰转移酶(OCT)ELISA试剂盒 ,英文名: OCT ELISA Kit
大鼠黏着斑蛋白(VCL)ELISA试剂盒 ,英文名: VCL ELISA Kit
大鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA试剂盒 ,英文名: visfatin ELISA Kit
大鼠内脂素(visfatin)ELISA试剂盒 ,英文名: visfatin ELISA Kit
大鼠内脏脂肪特异性*蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA试剂盒 ,英文名: vaspin ELISA Kit
大鼠内源性糖皮质激素(GC)ELISA试剂盒 ,英文名: GC ELISA Kit
大鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒 ,英文名: EL ELISA Kit
大鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒 ,英文名: ES ELISA Kit
大鼠内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒 ,英文名: eNOS-3 ELISA Kit
大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS/NOS3)ELISA试剂盒 ,英文名: eNOS/NOS3 ELISA Kit
大鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 ,英文名: eNOS ELISA Kit
大鼠内皮素转换酶2(ECE2)ELISA试剂盒 ,英文名: ECE2 ELISA Kit
大鼠内皮素转换酶1(ECE1)ELISA试剂盒 ,英文名: ECE1 ELISA Kit
大鼠内皮素受体A(ETR-A)ELISA试剂盒 ,英文名: ETR-A ELISA Kit
大鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒 ,英文名: ET-1 ELISA Kit
大鼠内皮素(ET-1)ELISA试剂盒 ,英文名: ET-1 ELISA Kit
大鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒 ,英文名: EG-VEGF ELISA Kit
大鼠内毒素(ET)ELISA试剂盒 ,英文名: ET ELISA Kit
大鼠内毒素(Endotoxin)ELISA试剂盒 ,英文名: Endotoxin ELISA Kit
大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒 ,英文名: BDNF ELISA Kit
大鼠脑源性神经生长因子(BDNF)ELISA试剂盒 ,英文名: BDNF ELISA Kit
大鼠脑钠肽前体N末端片段(NT-proBNP)ELISA试剂盒 ,英文名: NT-proBNP ELISA Kit
大鼠脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒 ,英文名: BNP ELISA Kit
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