培养基的配制

一、淀粉琼脂培养基（高氏1号培养基，培养放线菌用）

        可溶性淀粉 20g

        KNO₃　 1g

　　NaCl 0．5g

　　K₂　HPO₄　 0．5g

　　MgSO₄　 0．5g

　　FeSO₄　 0．01g

　　琼脂 20g

　　水 1000ml

　　pH 7．2—7．4

　　配制时，先用少量冷水，将淀粉调成糊状，在火上加热，边搅拌边加水及其他成分，溶化后，补足水分至1000ml。1．05kg/cm²　，121．3℃灭菌20分钟。

二、牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）

　　牛肉膏 3g

　　蛋白胨 10g

　　NaCl 5g

　　琼脂 15—20g

　　水 1000ml

　　pH 7．0—7．2

　　1．05kg/cm²　，121．3℃灭菌20分钟。

三、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）

　　葡萄糖 10g

　　蛋白胨 5g

　　KH₂　PO₄　 1g

　　MgSO₄　·7H₂　O 0．5g

　　1/3000孟加拉红（rose bengal，玫瑰红水溶液）

　　100ml

　　琼脂 15—20g

　　pH 自然

　　蒸馏水 800ml

　　0．56kg/cm²　（8磅/英寸²　），112．6℃灭菌30分钟。

　　临用前加入0．03%*稀释液100ml，使每毫升培养基中含*30μg。

四、马铃薯培养基 （实验16）

　　马铃薯 200g

　　蔗糖（或葡萄糖） 20g

　　琼脂 15—20g

　　水 1000ml

　　pH 自然

　　马铃薯去皮，切成块煮沸半小时，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，溶化后补足水至1000ml。1．05kg/cm²　，121．3℃灭菌20分钟。

五、麦芽汁琼脂培养基 （实验15）

　　1．取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，置15℃阴暗处发芽，上盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。

　　2．将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴锅中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。

　　3．将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20ml，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

　　4．将滤液稀释到5—6波美度，pH约6．4，加入2%琼脂即成。

　　1．05kg/cm²　，121．3℃灭菌20分钟。

六、半固体肉膏蛋白胨培养基 （实验26）

　　肉膏蛋白胨液体培养基 100ml

　　琼脂 0．35—0．4g

　　pH 7．6

　　1．05kg/cm²　，121．3℃灭菌20分钟。

七、葡萄糖-醋酸盐培养基 （实验15）

　　葡萄糖 1g

　　酵母浸膏 2．5g

　　* 8．2g

　　琼脂 15g

　　蒸馏水 1000ml

　　pH 4．8

　　分装试管，0．70kg/cm²　（10磅/英寸²　），115．2℃灭菌20分钟后制成斜面。

八、合成培养基 （实验36，39）

　　（NH₄　）₂　PO₄　 1g

　　KCl 0．2g

　　MgSO₄　·7H₂　O 0．2g

　　豆芽汁 10ml

　　琼脂 20g

　　蒸馏水 1000ml

　　pH 7．0

　　加12ml0．04%的溴甲酚紫（pH5．2—6．8，颜色由黄色变紫色，作指示剂）。1．05kg/cm²　，121．3℃灭菌20分钟。

九、油脂培养基 （实验40）

　　蛋白胨 10g

　　牛肉膏 5g

　　NaCl 5g

　　香油或花生油 10g

　　1．6%中性红水溶液 1ml

　　琼脂 15—20g

　　蒸馏水 1000ml

　　pH 7．2

　　1．05kg/cm²　，121．3℃灭菌20分钟。

　　注：1．不能使用变质油。

　　2．油和琼脂及水先加热。

　　3．调好pH后，再加入中性红。

　　4．分装时，需不断搅拌，使油均匀分布于培养基中。

十、明胶培养基 （实验40）

　　牛肉膏蛋白胨液 100ml

　　明胶 12—18g

　　pH 7．2—7．4

　　在水浴锅中将上述成分溶化，不断搅拌。溶化后调pH7．2—7．4。

　　0．56kg/cm²　（8磅/英寸²　），112．6℃灭菌30分钟。

十一、淀粉培养基 （实验40，45）

　　蛋白胨 10g

　　NaCl 5克

　　牛肉膏 5克

　　可溶性淀粉 2g

　　蒸馏水 1000ml

　　琼脂 15—20g

　　1．05kg/cm²　，121．3℃灭菌20分钟。

十二、蛋白胨水培养基 （实验42）

　　蛋白胨 10g

　　NaCl 5克

　　水 1000ml

　　pH 7．6

　　1．05kg/cm²　，121．3℃灭菌20分钟。

十三、明胶培养基 （实验40）

　　牛肉膏蛋白胨液 100ml

　　明胶 12—18g

　　pH 7．2—7．4

　　在水浴锅中将上述成分溶化，不断搅拌。溶化后调pH7．2—7．4。

　　0．56kg/cm²　（8磅/英寸²　），112．6℃灭菌30分钟。

十四、葡萄糖蛋白胨水培养基 （实验42）

　　蛋白胨 5g

　　葡萄糖 5g

　　K₂　HPO₄　 2g

　　蒸馏水 1000ml

　　将上述各成分溶于1000ml水中，调pH7．0—7．2，过滤。分装试管，每管10ml，0．56kg/cm₂　（8磅/英寸²　），112．6℃灭菌30分钟。

十五、酪蛋白培养基 （实验46）

　　KH₂　PO₄　 0．36g

　　Na₂　HPO₄　·12H₂　O 1．3g

　　NaCl 0．1g

　　ZnSO₄　·7H₂　O 0．02g

　　CaCl₂　·2H₂　O 0．002g

　　酪素 4g

　　酪素水解氨基酸 0．05g

　　琼脂 15—20g

　　蒸馏水 1000ml

　　pH 7．0—7．2

　　先称取4g酪素，再加入0．5mol/LNaOH约2ml，将酪素溶解；然后依次加入其他药品，zui后调pH7．0—7．2。0．56kg/cm²　（8磅/英寸²　），112．6℃灭菌30分钟。

十六、*培养基（TYEG培养基） （实验47）

　　胰蛋白胨 10g

　　酵母浸膏 5g

　　K₂　HPO₄　 3g

　　葡萄糖 1g

　　琼脂 15—20g

　　蒸馏水 1000ml

　　pH 7．0

　　1．05kg/cm²　，121．3℃灭菌20分钟。

十七、基本培养基（MM培养基） （实验47）

　　（NH₄　）₂　SO₄　 1g

　　K₂　HPO₄　 7g

　　KH₂　PO₄　 3g

　　柠檬酸钠 0．5g

　　MgSO₄　·7H₂　O 0．1g

　　葡萄糖 5g

　　琼脂 15—20g

　　蒸馏水 1000ml

　　1．05kg/cm²　，121．3℃灭菌20分钟。

十八、伊红美蓝培养基（EMB培养基） （实验60，61）

　　蛋白胨水琼脂培养基 100ml

　　20%乳糖溶液 2ml

　　2%伊红水溶液 2ml

　　0．5%美蓝水溶液 1ml

　　将已灭菌的蛋白胨水琼脂培养基（pH7．6）加热溶化，冷却至60℃左右时，再把已灭菌的乳糖溶液、伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作加入。摇匀后，立即倒平板。乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度，一般是0．70kg/cm²　（10磅/英寸²　），115．2℃灭菌20分钟。

十九、乳糖蛋白胨培养液（“水的细菌学检查”用） （实验60、61）

　　蛋白胨 10g

　　牛肉膏 3g

　　乳糖 5g

　　NaCl 5g

　　1．6%溴甲酚紫乙醇溶液 1ml

　　蒸馏水 1000ml

　　将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及Nacl加热溶解于1000ml蒸馏水中，调pH至7．2—7．4。加入1．6%溴甲酚紫乙醇溶液1ml，充分混匀，分装于有小倒管的试管中。0．70kg/cm²　（10磅/英寸²　），115．2℃灭菌20分钟。

二十、复红亚*培养基（远藤氏培养基） （实验60，61）

　　蛋白胨 10g

　　乳糖 10g

　　K₂　HPO₄　 3．5g

　　琼脂 20—30g

　　蒸馏水 1000ml

　　无水亚* 5g左右

　　5%碱性复红乙醇溶液 20ml

　　先将琼脂加入900ml蒸馏水中，加热溶解，再加入*及蛋白胨，使溶解，补足蒸馏水至1000ml，调pH至7．2—7．4。加入乳糖，混匀溶解后，0．70kg/cm²　（10磅/英寸²　），115．2℃灭菌20分钟。称取亚*置一无菌空试管中，加入无菌水少许使溶解，再在水浴中煮沸10分钟后，立刻滴加于20ml5%碱性复红乙醇溶液中，直至深红色褪成淡粉红色为止。将此亚*与碱性复红的混合液全部加*述已灭菌的并仍保持溶化状态的培养基中，充分混匀，倒平皿，放冰箱备用。贮存时间不宜超过2周。