上海沪峰生物科技有限公司作者
背景:甜瓜为藤蔓植物,染色体小,细胞质浓厚,过去一直是以根尖作为染色体计数的材料,随着甜瓜多倍体育种方法的多样化,根尖染色体计数已经不能满足于育种的需要,所以急需更快更好的染色体计数方法。
方法改进:本实验采用去壁—低渗火焰干燥法用甜瓜的幼嫩叶尖为材料,对甜瓜染色体进行计数。实现了材料易得,结果更好的目的。改方法还能用于对甜瓜茎蔓的倍性变化进行跟踪监测。
取样前一天,给甜瓜植株叶面喷足水,以刺激嫩芽旺盛生长,随机选取并标记22个嫩芽。上午8点左右,每个芽取1-2mm的嫩芽叶尖,用作实验材料。将叶尖置于敞口的Ep管中,室温下,用现配的0.002mol/L-1的8-羟基喹啉*浸没材料,暗处放置2.5h、3.0h和3.5h,中间每隔一小时摇动一次Ep管。用卡诺固定液(甲醇和冰醋酸体积比3:1)固定1h以上。固定后,三级水冲洗3遍,用纤维素酶-果胶酶混合酶液处理叶尖2h、2.5h和3h。吸去酶液,用三级水浸泡0.5h。吸干水,加入卡诺固定液,放置1h后,涂片、火焰干燥。用Giemsa染色液扣染3-4min后,冲洗掉染液,电吹风吹干后进行镜检并摄像。实验过程大约8h,加上镜检所需时间,一天就能得到甜瓜的染色体数目鉴定结果。
结果:
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