液相色谱法测定豆制品中酸性橙Ⅱ和酸性金黄

认识还比较肤浅，本文对液相色谱仪法测定酸性橙Ⅱ和酸性金黄进行了初步探讨。此方法还有待进一步完善。

豆制品中酸性金黄Ⅱ经粉碎，［摘要］本文探讨液相色谱法测定豆制品中酸性橙Ⅱ和酸性金黄含量的方法。提取，过滤，得到样品提取液用液相色谱测定，流动相是甲醇乙酸铵0.02mol/L=75+25检测波长450nm时，流速1.0ml/min测定，色谱柱为SymmetryC18250mm4.6mmid5μm

［关键词］豆制品；酸性金黄Ⅱ；液相色谱

木制家具、毛线、布料等的着色剂，豆制品中酸性橙Ⅱ和酸性金黄是医学中应用于组织染色。但不法商贩利用其颜色鲜艳、着色稳定、价廉的特点非法添加于豆制品中，严重危害了广大消费者的身体健康，国家尚无相应的检验规范方法，本文初步建立了用液相色谱法测定酸性橙Ⅱ和酸性金黄的方法，该方法能快速、准确、简便的检出酸性橙Ⅱ和酸性金黄，能满足食品检验的需要。

1试验局部

1.1仪器和试剂

1.1.1仪器

2487型紫外检测器，液相色谱仪包括Waters1525型泵。Breez色谱工作站及手动进样器。

1.1.2规范品

酸性橙Ⅱ（纯度86%和酸性金黄（工业用纯度90%

1.1.3甲醇

色谱纯。

1.1.4超纯水

由AKUPⅡI20型超纯水机提供的高纯水。

pH=4.7 1.1.50.02mol/L乙酸铵溶液。

1.1.6碱性提取液

无水乙醇∶氨水∶水=70∶20∶10

1.2色谱条件

检测波长450nm进样量20μl 液相色谱柱为SymmetryC18250mm4.6mmid5μm流动相甲醇：0.02mol/L乙酸铵溶液=75+25溶液流速1.0ml/min柱温为常温。

1.3规范品的制备

配成系列浓度为00.01μg/ml0.05μg/ml0.10μg/ml0.50μg/ml1.00μg/ml规范系列。吸取混合规范贮藏液1.00mg/ml适量。

1.4样品前处理

加pH=6水50ml混匀，称取混匀粉碎的样品5.00g~10.00g于100ml烧杯。过滤，滤液加入1.00g聚酰胺粉用，G3漏斗抽滤，pH=6水冲洗2次~3次，碱性提取液解吸2次~3次，每次5ml收集解吸液，水浴挥干，将残渣用蒸馏水溶解，定容至5ml然后过0.45μm滤膜。规范和样品滤液注入HPLC系统，按上述色谱条件测定。以保管时间定性，峰面积定量。

2结果

2.1波长选定

进行紫外扫描，用流动相稀释规范溶液。由扫描图谱可知，酸性Ⅱ和酸性金黄在450nm有较大吸收，所以我选取450nm为检测波长。

2.2工作曲线与检测限

其结果表明，以工作液含量X对色谱峰面积Y进行线形回归。酸性橙Ⅱ和酸性金黄在0.11μg/ml~1.00μg/ml范围内线性关系（Linearrang良好。回归方程（Regressionequ线性范围，相关系数（Correlationcoeffici及检测限（DetectionlimitS/N=3见表1表1规范曲线及检出限项目。

3讨论